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人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2023-12-21      瀏覽次數:578

人胰島素原  (PI)ELISA使用說(shuō)明書(shū)

胰島素原(PI)是胰島素的前體激素  它是由由胰島β細胞合成和分泌  主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個(gè)單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學(xué)的Donald F. Steiner教授在1967年發(fā)現的。


本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 HRP  酶結合物  中間經(jīng)過(guò)溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 TMB 在過(guò) 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm  波長(cháng)下測定

吸光度(OD   計算樣品濃度。

靈敏度:4.79pg/mL

檢測范圍12.5-800pg/mL

特異性:可檢測樣本中人的PI ,且與其類(lèi)似物無(wú)明顯交叉反應。

image.png

濃度(pg/mL)

800

400

200

100

50

25

12.5

0

OD  

2.32

1.93

1.31

0.85

0.51

0.39

0.28

0.1

校正 OD  

2.22

1.83

1.21

0.75

0.41

0.29

0.18

-


試劑盒性能:

1.    重復性 :板內變異系數小于  10% ,板間變異系數小于  10%

2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入  3  個(gè)不同

濃度水平的人PI ,計算回收率。

 

樣本類(lèi)型

范圍(%

平均回收率(%

血清(n=8)

84- 101

96

血漿(n=8)

92- 105

102

細胞培養上清(n=8)

96- 108

105

3.    線(xiàn)性稀釋?zhuān)悍謩e在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入

高濃度人PI ,在標準曲線(xiàn)動(dòng)力學(xué)范圍內進(jìn)行稀釋 ,評估線(xiàn)性。

 

稀釋比例

回收率(%

血清

血漿

細胞培養上清

12

范圍

 

84-95

 

88-97

 

90- 110

平均回收率

 

91

 

93

 

96

14

范圍

89- 103

87- 108

105- 115

平均回收率

94

98

109



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